科研进展｜周帆团队解析胚胎前后轴发生的新模式
前后轴（anterior-posterior axis，AP axis）建立是哺乳动物胚胎发育中的重要事件，该过程的异常将导致胚胎着床后发育失败与流产。着床后，小鼠胚胎远端内脏内胚层（Distal visceral endoderm, DVE）从远端向胚胎单侧迁移，而后定位于胚胎前侧，形成前内脏内胚层（Anterior visceral endoderm，AVE）。AVE释放的信号分子作用于临近的上胚层（epiblast，EPI），促进其特化具有胚胎体前侧的特征，而对侧EPI由于远离AVE信号而特化形成原条，至此胚胎前后轴正式建立【1,2】。DVE和AVE作为前后轴形成过程中的关键细胞群体，经典理论倾向于认为它们是细胞迁移过程中同一类细胞的先后两种状态，即DVE是AVE的前体细胞；近年来也有研究提出DVE和AVE是同时存在的两类不同的细胞，且AVE可能来源于非DVE细胞【3,4】。为此，DVE和AVE具体的起源和特化模式，以及对应的分子调控规律有待进一步揭示。
2023年1月9日，生命中心周帆课题组在Developmental Cell杂志在线发表了题为“Decoding anterior-posterior axis emergence among mouse, monkey, and human embryos”的研究论文。该研究结合高精度组学与拟时分析，空间分布验证等体系，发现小鼠前后轴形成的关键细胞群体DVE和AVE具有各自独立的起源与发育轨迹；跨物种对比显示非人灵长类与人类胚胎前后轴形成过程中则仅含有AVE细胞；现有基于干细胞诱导/重构的类胚胎模型中不含有前后轴相关细胞群体。
为解析胚胎前后轴形成过程中两个关键细胞群体的起源与发育模式，作者结合单细胞组学分析与拟时预测，发现小鼠胚胎前后轴形成过程中DVE与AVE具有独立的着床前起源，并且在着床后沿着各自的发育轨迹逐渐成熟和特化。结合空间转录组和新标志基因挖掘，作者发现两群细胞从着床前的囊胚阶段开始，共经历了4个代表性阶段：pro-DVE -> pre-DVE -> early-DVE -> late-DVE；pro-AVE -> pre-AVE -> early-AVE -> late-AVE，各个阶段细胞群体具有独特的基因表达模式。为了鉴定DVE与AVE在发育过程中的空间分布特点，作者结合新鉴定的标志分子、全胚胎免疫荧光成像和已发表的空间转录组挖掘【5】，发现多个阶段的DVE或AVE群体能被原位识别与标记，且具有不同的定位与分布规律。进一步，不同物种间细胞群体的基因表达谱对比分析显示，与小鼠不同，非人灵长类和人类胚胎中仅存在AVE相关群体，这暗示不同物种的前后轴相关群体与特化模式可能存在较大差异。
近年来，基于干细胞多能性与自组装特性构建的类胚胎体系为人类胚胎研究带来了新思路。另一方面，类胚胎在体外培养中呈现一定程度的着床后发育瓶颈，而前后轴形成是围着床期胚胎正常发育的前提。为查看类胚胎中是否存在前后轴特化潜能的细胞群体，作者通过进一步的对比分析发现，与人类自然囊胚不同，当前基于干细胞构建的人类类囊胚 (blastoid) 并不含有DVE或AVE前体细胞。该结果暗示在诱导类胚胎的过程和体系中，关注和加入具有前后轴潜能的关键前体细胞，可能是优化类胚胎体系和提升着床后发育潜能的潜在策略。
综上所述，这项研究在基因表达维度上定义了胚胎前后轴发生过程中关键群体DVE和AVE的发育全过程：这两群细胞很可能起源于着床前的囊胚阶段，随后沿着各自独立的发育路径特化，且分别经历了多个代表性阶段。相比小鼠，灵长类胚胎则只含有AVE，现有小鼠和人类胚胎模型缺失DVE或（和）AVE相关谱系。这项研究揭示了哺乳动物胚胎前后轴形成过程中关键谱系的起源与特化规律，为深入理解围着床胚胎发育与分子调控模式提供了线索与依据。
生命中心PI周帆为该论文的通讯作者。周帆课题组科研助理朱庆元、2020级博士生葛吉涛、2021级博士生刘莹为并列第一作者，参与该工作的还有博士后徐嘉雯和2020级博士生鄢胜镒。该研究得到生命科学联合中心、清华大学实验动物中心、膜生物学国家重点实验室平台、清华大学尼康影像中心的支持与帮助。
原文链接：https://doi.org/10.1016/j.devcel.2022.12.004
参考文献
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