周岳课题组通过遗传学和多组学方法分析了PWO1蛋白的结合位点以及PWOs突变体的染色质3D结构,研究结果显示PWO1蛋白结合位点富含H3K4me3、H3K36me3等激活性组蛋白修饰,但与抑制性组蛋白修饰H3K27me3互斥。此外,PWO1蛋白倾向性的结合在H3K27me3-CDs边界区域,并起维持边界强度的作用。同时,研究人员发现PWOs在调控H3K27me3-CDs内染色质结构起到重要作用。在pwo123突变体或PRC2的功能缺失突变体(clf swn)中,H3K27me3-CDs内染色质区室发生翻转,同时区室强度也显著降低。研究人员进一步通过荧光原位杂交(3D-FISH)技术检测了其中一个H3K27me3-CD的空间位置。研究数据表明PWOs蛋白或PRC2的功能缺失导致H3K27me3-CDs从核外周迁移到细胞核内部。
此外,研究结果表明pwo123和crwn1突变体的染色质结构变化高度相似。首先,在crwn1突变体中,被PWO1结合的H3K27me3-CDs的互作强度显著降低;其次,crwn1突变体中H3K27me3-CDs内也发生了染色质区室的转换。RNA-seq结果显示,在pwo123和crwn12突变体中,H3K27me3-CDs中的差异表达基因高度重叠,与野生型相比,突变体中的差异表达基因表达水平显著升高。这些结果表明PWOs和CRWNs协同调节染色质结构并抑制基因转录(图一)。